PicoGreen是一種特異性結合雙鏈DNA dsDNA) 的飽和熒光染料，激發波長為480 nm，發射波長為520 nm，與大多數熒光計和熒光酶標儀兼容。PicoGreen僅與dsDNA結合后才發出熒光，不受核苷酸和單鏈核酸的影響，產生的熒光強度與dsDNA濃度成正比，且無序列依賴性，非常適合于dsDNA的定量檢測，可檢出25 pg/ml~1 μg/ml濃度范圍內的dsDNA。PicoGree有以下優勢：1 靈敏度高：可檢測低至200 pg的dsDNA，節省寶貴樣品；2 特異性強：在等摩爾的RNA存在的條件下，對dsDNA具有特異性；3 耐受性好：耐受較高濃度的鹽、尿素、乙醇、氯仿、去垢劑、蛋白或瓊脂糖，可以直接定量PCR擴增產物而無需從反應混合物中純化DNA。4 易于使用——只需在樣品中加入染料，等待5分鐘，然后讀數即可，且適用于96和384孔板；與大多數基于熒光的酶標儀和熒光計兼容。5 適用范圍廣：可適用于PCR的分析、芯片樣品、DNA損傷分析、酶活分析、基因組DNA定量以及復雜混合物中dsDNA的檢測和病毒DNA定量等多種領域。

參考操作：

一．染料工作液的配置 PicoGreen dsDNA定量試劑取出后回溫至室溫，該試劑是以100 µL 200×的濃縮液形式保存于無水DMSO中的。實驗當天，根據實驗用量用1×TE（10 mM Tris-HCl，1 mM EDTA，pH 7.5）按1:200 的比例稀釋PicoGreen濃縮液。 注意事項：

1 由于試劑容易吸附到玻璃表面，要在塑料容器中配制。

2 PicoGreen試劑見光易降解，所以應將配好的溶液用鋁箔包住或放置暗處避光保存。

3 溶液最好在配制好數小時內使用，以保證最佳結果。

二．標準品工作液的配制 取λDNA標準品，用無菌TE buffer配制成100 μg/mL的標準品工作液。

注意事項：標準品也可用其他已知濃度的純化DNA；有一些產品描述可使用小牛胸腺DNA作為標準品，按照我們實際操作經驗，并不推薦它作為標準品。  

三．標準品工作液稀釋

1 母液稀釋：使用TE緩沖液將100 μg/mL的標準品稀釋為2 μg/mL。

2 梯度稀釋：參照表1，對DNA標品母液進行梯度稀釋。 表1 標曲制作 TE體積（μL） 2 μg∕mL DNA標準品母液（μL） Picogreen染料工作液（μL） DNA標準品終濃度 0 1,000 1,000 1 μg/mL 900 100 1,000 100 ng/mL 990 10 1,000 10 ng/mL 999 1 1,000 1 ng/mL 1,000 0 1,000 Blank  

3 標準曲線的制備：向經稀釋的各梯度標準品溶液中加入1 mL染料工作液混勻，避光室溫孵育5 min。使用酶標儀或熒光計檢測熒光強度（Ex=480 nm，Em=520 nm）；將溶液加入比色皿或取200 μL加入微孔板，確信不要在樣品中引入氣泡；以1×TE緩沖液空白對照，測定標準品熒光值；用標準品溶液的濃度（ng/mL）對應的熒光強度作直線回歸，制備標準曲線。

4 測量剩余樣品的熒光值：熒光計將給出一個直接的濃度讀數，數據可以用來產生DNA濃度的標準曲線。

注意事項：

為了您的健康，請佩戴一次性手套。

本產品僅限科研用途。